К работе в бактериологической лаборатории допускаются лица не моложе 18 лет, не имеющие противопоказаний по состоянию здоровья и прошедшие вводный инструктаж.
Каждый сотрудник лаборатории должен иметь закрепленное за ним рабочее место. Каждое рабочее место врача и лаборанта имеет обязательный комплект оборудования: спиртовую или газовую горелку; контейнер с дезинфицирующим раствором, закрывающийся крышкой; банку с дезраствором для использованных в работе предметных и покровных стекол; плотно закрывающуюся банку для хранения чистых, обезжиренных стекол в смеси Никифорова (рецепт 1); набор бактериологических петель разного диаметра; лупу 5-кратного увеличения; микроскоп.
В ящиках стола находится дневной запас стерильных пастеровских и градуированных пипеток разного объема. Перед началом работы следует надеть халат, который хранится отдельно от верхней одежды.
При работе со спиртовкой необходимо иметь под рукой одеяло, плотную ткань и т.д. для быстрого тушения огня в случае аварии.
Насасывание в пипетки растворов химических реактивов и Жидкостей, содержащих возбудителей инфекционных заболеваний, производят с помощью резиновой груши или автоматической пипетки. Насасывание ртом не допускается.
Материал для исследования доставляют в лабораторию в Контейнерах, биксах или сумках-холодильниках. Емкости с Жидкими материалами закрывают пробками, исключающими выливание содержимого во время транспортирования. Дно Контейнеров, содержащих емкости с патогенными биологическими агентами (ПБА), покрывают адсорбирующим материалом (марлевая салфетка, ткань, вата и др.). Не допускается доставка материала в хозяйственных сумках, чемоданах, портфелях и других предметах личного пользования.
Сопроводительную документацию к направляемому материалу прилагают отдельно, в целлофановом пакете.
При приеме и разборке в лаборатории материала, доставленного на исследование, персонал использует маски и резиновые перчатки. Емкости с ПБА помещают на поднос или лоток, покрытый многослойной марлевой салфеткой, смоченной дезинфицирующим раствором. При сортировке образцов материала особое внимание лаборант уделяет надежности упаковки и целостности посуды, в которой он находится. Обнаружение каких-либо изъянов стекла, загрязнение наружной поверхности посуды содержащимся в ней материалом, отсутствие пробок или крышек в сосуде, содержащем материал, служат достаточным основанием для отказа в его приеме.
Во время работы двери боксов и предбоксников следует закрывать, а выход из этих помещений запрещать. Бокс должен быть оснащен средствами сигнализации на случай аварии.
Для посевов используют бактериологическую петлю, замкнутую в непрерывное кольцо, с плечом не более 6 см. Допускается применение одноразовых промышленно изготовленных петель с большей длиной плеча.
Работа с посевами выделенных возбудителей и чистыми культурами микробов ведется близ пламени горелки. В процессе работы каждая процедура с взятием или внесением в среду культур микробов или пересеваемого материала сопровождается прожиганием "горлышка" сосудов (колб, пробирок, флаконов), из которых берут или в которые вносят исследуемый материал. Соответственно перед проведением каждого посева и после него бактериологические петли или металлические шпатели прокаливают в пламени горелки.
НЕЛЬЗЯ прикасаться руками к исследуемому материалу и культурам микробов. Все необходимые операции с названными объектами проводятся только с помощью специальных инструментов.
Запрещается переливать инфицированные жидкости из одного сосуда в другой; оставлять на столах без присмотра нефиксированные мазки, открытую посуду с посевами.
Ампулы с высушенными ПБА вскрывают стерильно над подносом или лотком с марлевой салфеткой, пропитанной дезинфицирующим раствором. Верхний конец ампулы нагревают над пламенем горелки, снимают парафин, затем кусочком стерильной ваты, смоченным в стерильной воде, осторожно прикасаются к оттянутому концу ампулы для образования трещины. Той же влажной ватой обводят вокруг носика ампулы. После образования трещины конец ампулы накрывают марлевой салфеткой или ватой и обламывают пинцетом.
По окончании работы все объекты, содержащие ПБА, убирают в хранилища (холодильники, термостаты, шкафы и т.д.) и обязательно проводят дезинфекцию рабочих поверхностей столов.
Использованные в работе с инфицированным материалом стеклянные шпатели, пастеровские и градуированные пипетки погружают в емкость с дезинфицирующим раствором.
Пробирки и флаконы со сгустками крови обеззараживают только дезинфицирующим раствором. При этом емкость берут анатомическим пинцетом так, чтобы одна его бранша вошла немного внутрь, затем погружают ее в дезинфицирующий раствор в наклонном положении до полного заполнения этим раствором. При правильном погружении воздушных пузырей не образуется и емкость опускается на дно. После погружения всех емкостей пинцет обеззараживают.
После завершения работы помещение "заразной" зоны лаборатории запирают и опечатывают. При наличии коллекции культур микроорганизмов дополнительно опечатывают их хранилища. Опечатывание и снятие печатей производят сотрудники лаборатории, имеющие разрешение руководителя лаборатории.
Каждый сотрудник лаборатории должен быть обеспечен индивидуальной рабочей одеждой: медицинскими халатами, сменной обувью, масками, резиновыми перчатками в соответствии с действующими правилами.
При проведении исследований в боксированных помещениях медицинский халат меняют на хирургический, доходящий до нижней трети голени, используют резиновые перчатки, тапочки, респираторы.
Смена рабочей одежды проводится по мере загрязнения, но не реже одного раза в неделю. Перед сдачей в стирку защитную одежду обеззараживают.
В лаборатории необходимо хранить как минимум недельный запас дезинфицирующих средств. Вновь поступающие на склад серии дезинфицирующих средств следует контролировать на содержание действующего вещества. Дезинфицирующие растворы готовит лаборант. На емкости с дезинфицирующим раствором должны быть указаны его название, концентрация и дата приготовления.
Автоклавирование проводится персоналом, имеющим свидетельство об окончании специальных курсов.
Текущая уборка помещений проводится ежедневно влажным способом после окончания рабочего дня: в "чистой" зоне лаборатории – с применением моющих средств, в "заразной" зоне – с применением дезинфектантов. "Чистая" и "заразная" зоны лаборатории обеспечиваются отдельным промаркированным уборочным инвентарем, перенос которого из зоны в зону не допускается. В боксовых помещениях должна проводиться еженедельная генеральная уборка с применением дезинфицирующих средств путем протирания поверхности мебели, приборов, аппаратов, а также стен (на высоту до 2 м).
По окончании дезинфекционной обработки и влажной уборки в боксе включают бактерицидные УФ-лампы: БУВ-40, БУФ-60 и др. на 30–60 мин. В последнее время широкое распространение получили установки обеззараживания воздуха (УОВ-40-02), которые могут работать в присутствии людей.
Настенные закрытые установки "Аэробакт-10" и "Аэробакт-12", используемые в помещении лабораторий и боксов, изготовлены из кварцевого стекла высокой степени чистоты. Специальное покрытие исключает образование озона и вредных диоксидов в воздухе, обеспечивая УФ-излучение большой мощности, достаточное для разрушения всех микроорганизмов в помещении объемом 60 м3.
При возникновении аварийных ситуаций, таких как розлив инфицированного материала в случае опрокидывания емкостей при работе на центрифугах, разбивания пробирок и чашек Петри с посевами, а также стеклотары в связи с перепадом температур при работе на автоклаве, немедленно прекращают работу с ПБА и ставят в известность руководителя лаборатории. Все открытые части тела обрабатывают дезинфицирующим раствором или 70% раствором этанола. При попадании инфицированного материала на слизистые оболочки их немедленно обрабатывают: глаза – 1 % раствором борной кислоты, несколькими каплями 1% раствора азотнокислого серебра или струей воды; в нос закапывают, а рот и горло прополаскивают 0,05% раствором перманганата калия или 1% раствором борной кислоты. При аварии, приведшей к повреждениям кожных покровов, перчатки (если работа проводилась в них) обрабатывают дезинфицирующим раствором, снимают их, из ранки выдавливают кровь, руки обрабатывают 70% раствором этанола, протирают их тампоном не менее 2 мин, затем моют водой с мылом, ранку смазывают раствором йода.
- При инфицировании сотрудников специализированных лабораторий по изучению туберкулеза материалом, содержащим микобактерии, пораженные участки обрабатывают активированным раствором хлорамина Б или ХБ в течение не менее 2 мин.
- При содержании в материале споровых форм микробов, вирусов или хламидий кожу обрабатывают 1 % активированным раствором хлорамина Б или ХБ.
- При загрязнении материалом, содержащим риккетсии, зараженные участки незащищенной кожи в течение не менее 2 мин протирают тампоном, смоченным одним из следующих растворов: 70 % раствор спирта; 3 % раствор хлорамина Б или ХБ; 3 % осветленный раствор хлорной извести или белильной термостойкой извести; 1,5 % раствор ДТС ГК, НГК или ГКТ.
После обеззараживания места аварии защитную одежду замачивают в дезинфицирующем растворе. Сотрудники, находившиеся в зоне аварии, должны принять душ.
При аварии во время работы на центрифуге крышку медленно открывают только через 30–40 мин (после оседания аэрозоля). Центрифужные стаканы и разбитое стекло помещают в дезинфицирующий раствор; поверхность крышки, внутренние части центрифуги, ее наружную поверхность дезинфицируют после отключения центрифуги от электросети.
Для ликвидации последствий аварии, а также профилактики возможного поражения персонала в лабораториях необходимо иметь аптечку для оказания экстренной медицинской помощи, запас дезинфицирующих средств, средства индивидуальной защиты (СИЗ), емкости для замачивания СИЗ, гидропульт или автомакс, которые хранят в специально отведенном месте.
Аптечка экстренной помощи должна включать 70 % этиловый спирт, раствор йода, сухие навески перманганата калия нитрата серебра и борной кислоты, которые в случае аварии растворяют в мерном объеме дистиллированной воды для получения требуемых концентраций дезинфицирующих средств, стерильную дистиллированную воду, глазные пипетки, ножницы, перевязочные средства, бактерицидный пластырь.
За лицами, находившимися в помещении, где произошла и пария, устанавливают медицинское наблюдение на срок возможного инкубационного периода.
В журнале регистрации аварий отмечают дату, время, место, характер аварии, фамилии, имена и отчества лиц, находившихся в зоне ее воздействия, а также проведенные мероприятия.
В главе учтены основные требования СП 1.2.731–99 "Безопасность работы с микроорганизмами III–IV групп патогенности и гельминтами" (Минздрав России, Москва, 1999).