По 1 мл разведений почвы (до 1:106), прогретой при темпе­ратуре 75±5 °С в течение 20 мин для исключения вегетативных форм, вносят в два параллельных ряда пробирок. Затем по стенке пробирок, избегая образования пузырьков воздуха, на­ливают по 9–10 мл железосульфитный агар (рецепт 101), при­готовленный ex tempore и прогретый до 70–80 °С. Для созда­ния анаэробных условий роста пробирки быстро охлаждают, помещая в емкости с холодной водой. Посевы инкубируют при 44±1 °С в течение 16–18 ч. При росте в среде черных крупных колоний (грамположительные, каталазоотрицательные) выдают положительный ответ о присутствии С. perfringens в 1 г почвы.

Определение С. perfringens методом фильтрования в пробирках и в чашках Петри проводят аналогично исследованию питьевой воды.