ПЕТРИТЕСТ

Российские микробиологические экспресс-тесты
+7 903 328 8043
 

Энтерококки – грамположительные, не образующие каталазу кокки, слегка вытянутые, с заостренными концами, рас­полагающиеся попарно или в виде коротких цепочек, реже одиночными кокками. Полиморфны. При росте на жидких средах [лактозопептонная среда (рецепт 95) и щелочная энтерококковая среда (рецепт 121)] вызывают диффузное помутнение и образование осадка. Энтерококки определяют титрационным методом и методом мембранной фильтрации.

Титрационный метод. Из разведений почвенной суспензии, прошедшей предварительную обработку, стерильной пипеткой берут 10 мл и засевают во флаконы с 50 мл жидкой среды ЛПС (рецепт 95) или ЩЭС (рецепт 121). Посевы инкубируют при температуре 37±0,5 °С           24 ч. Из среды накопления, где отмечены признаки роста, производят высев петлей на одну из плотных питательных сред МИС, ЖСТ (рецепты 122, 123). Через 24–48 ч инкубации посевов при температуре 37±0,5 °С на молочно-ингибиторной среде отмечают наличие аспидно-черных, выпуклых, с металлическим блеском (Е.faecalis) или сероватых мелких, плоских колоний (Е.faecium). Подтверждают принад­лежность колоний к энтерококкам с помощью микроскопирования окрашенных по Граму мазков и постановкой каталазного теста (см. гл. 9, с. 95–97 – добавление 3 % Н202 к материалу исследуемой колонии).

Метод мембранных фильтров. Объем испытуемой пробы для посева выбирают с таким расчетом, чтобы не менее чем на двух фильтрах выросли изолированные колонии в количестве от 5 до 50.

Через мембранные фильтры профильтровывают два-три деся­тикратных объема испытуемой пробы. Фильтры с посевом поме­щают на азидную среду (рецепт 124) или среду ЖСТ (рецепт 123) и инкубируют при температуре 37±0,5 °С в течение 24–48 ч.

На среде ЖСТ через 24–28 ч колонии энтерококков плоские крупные с ровными краями, белые или бледно-окрашенные с небольшим кремовым или розовым оттенком, а также мали­новые. Последние образованы Е. faecalis.

На азидной среде – колонии энтерококков выпуклые с ров­ными краями, розовые, светло-розовые, равномерно окрашен­ные или с темно-красным нечетко оформленным центром.

Все колонии, которые растут на азидной среде, можно от­нести к фекальным энтерококкам, имеющим индикаторное значение.

При обнаружении в мазках энтерококков подсчитывают число колоний на фильтрах, суммируют и делят на объем профильтрованной воды.