Для проведения этапа пробоподготовки – выделения ДНК из биоматериала – необходимы:

  • набор реагентов для выделения ДНК (РНК) из клиничес­кого материала;
  • настольная высокоскоростная микроцентрифуга (до 12 ООО об./мин);
  • твердотельный термостат на 45–55°С;
  • встряхиватель для микропробирок (типа микроцентрифуга -вортекс);
  • комплект полуавтоматических микропипеток-дозаторов объ­емом 0,5-10, 5-40, 40-200 и 200–1000 мкл;
  • водоструйный или вакуумный насос с колбой-ловушкой.
 
   

Рис. 14.3. Прибор "Термоциклер" для проведения полимеразной цеп­ной реакции.

Для проведения реакции амплификации необходимы:

  • "Набор реагентов для проведения ПЦР";
  • программируемый термостат (амплификатор) (рис. 14.3).

Выбор модели амплификатора определяется конкретными задачами, стоящими перед диагностической лабораторией, ее возможностями и планируемым потоком анализов. Модели программируемых термостатов отличаются друг от друга коли­чеством гнезд для пробирок, системой охлаждения (водяное или воздушное), объемом памяти при программировании, сис­темой программирования, скоростью работы. Существуют одноплатформенные и многоплатформенные модели амплификаторов. Многоплатформенные модели позволяют проводить ПЦР по нескольким разным программам на всех платформах, что дает возможность анализировать пробы на наличие не­скольких разных типов возбудителей одновременно.

Для регистрации результатов амплификации необходимы:

  • источник постоянного тока и камера для электрофореза;
  • СВЧ-печь или водяная баня на 95–100°С;
  • комплект полуавтоматических микропипеток-дозаторов объ­емом 0,5–10, 5-40, 40-200 и 200–1000 мкл;
  • диспенсер;
  • ультрафиолетовый трансиллюминатор;
  • ряд вспомогательных реактивов, не входящих в состав "На­бора реагентов для обнаружения возбудителей инфекций методом ПЦР":
  • агароза;
  • 50-кратный ТАЕ-буфер для электрофореза (2М Трис-ацетат, рН 8,2, 0.05М ЭДТА);
  • 6-кратный буфер с красителем для нанесения образца на агарозный гель (40 % сахароза, 0,25 % бромфеноловый синий);
  • 1 % раствор бромида этидия.

Кроме того, для проведения анализов необходим ряд рас­ходных материалов:

  • стерильные пластиковые микропробирки объемом 1,5 мл для забора материала;
  • стерильные пластиковые микропробирки объемом 0,5 мл для проведения реакции амплификации;
  • стерильные пластиковые наконечники к микропипеткам;
  • стерильные наконечники с фильтрами к микропипеткам;
  • штативы для микропробирок;
  • пластиковые шприцы к диспенсеру;
  • одноразовые резиновые или латексные перчатки.