Подвижные бактерии в зависимости от количества и расположения жгутиков подразделяются на монотрихи – с одним жгутиком, амфитрихи – бактерии, жгутики которых расположены по полюсам клеток, лофотрихи – клетки, имеющие пучок жгутиков на одном из полюсов, перитрихи – клетки со жгутиками по всей поверхности тела. Окрашиваются жгутики с трудом, поэтому для их окраски применяют протравы, которые увеличивают толщину жгутиков и повышают возможность их окраски.
При изготовлении препаратов для обнаружения жгутиков необходимо пользоваться очень чистыми, хорошо обезжиренными стеклами. Рекомендуется работать с новыми покровными стеклами, которые предварительно кипятят в течение 10 мин в хромовой смеси (с. 52). После кипячения стекла промывают в течение 5 мин в слабом растворе гидроксида натрия (NаОН), после чего обильно промывают водой, ополаскивают спиртом и помещают в банки со смесью Никифорова. Из банок стекла вынимают чистым пинцетом, смесь Никифорова удаляют прожиганием стекла на огне.
При изготовлении препаратов используют молодые микробные культуры (12–18-часовые), выращенные при оптимальной для данного вида микроба температуре.
6.7.1. Окраска жгутиков серебрением в модификации Морозова
Прокаленной и охлажденной петлей слегка прикасаются к поверхности микробной культуры на плотной питательной среде и переносят петлю в преципитационную пробирку, на дно которой налито 0,1–0,2 мл 1 % раствора формалина. Чтобы не вызвать механического повреждения жгутиков, петлю оставляют в формалине в неподвижном состоянии 2–3 мин. За это время часть бактерий с петли "переходит" в раствор формалина. Приготовленную взвесь ставят в термостат при 37 °С на 2 ч.
Затем в пробирку с 3–4 мл дистиллированной воды вносят одну каплю формалиновой бактериальной взвеси. Через 10– 15 мин после того, как бактерии распределятся по всей жидкости более или менее равномерно, бактериальной петлей наносят 5–6 капель взвеси на предметное стекло, стараясь при этом, чтобы петля не задела его поверхности. Не размазывая, капли подсушивают на воздухе и наливают на них протраву – раствор танина в карболовой кислоте (рецепт 6) и подогревают до появления паров. После подогревания остатки протравы тщательно смывают дистиллированной водой, после чего мазок окрашивают раствором нитрата серебра (рецепт 30). Раствор наливают на стекло и в течение 2–2,5 мин подогревают на Минь слабом огне до появления в местах нанесенной культуры пятен слабо-коричневого цвета. При микроскопии тела микробных клеток окрашиваются в угольный цвет. Жгутики имеют коричневый цвет различных оттенков на бесцветном или слабо-желтом равномерно окрашенном фоне.