При простых способах окраски применяют какой-нибудь один краситель: метиленовый синий или водно-спиртовой раствор фуксина.
Простыми способами окраски пользуются для обнаружения в микроскопируемом материале микробов, определяя их количество, форму и расположение.
Препараты, содержащие, кроме бактерий, тканевые и клеточные элементы, красят метиленовым синим. При этом фон препарата окрашивается значительно слабее, чем тела микробных клеток.
6.3.1. Техника окраски мазков
Окраска мазков красящими бумажками по А.И. Синеву. Для окраски мазков пользуются растворами красок или красящей бумагой, предложенной А.И. Синевым. Простота приготовления, удобство применения, а также возможность хранения красящих бумаг в течение неограниченно долгого времени явились основанием для широкого их использования при различных способах окраски. Рецепты приготовления красок и реактивов, применяемых при окраске бактериальных препаратов, даны в Приложении (рецепт 26).
Окраска мазков красящей бумагой. На высушенный и фиксированный препарат наносят несколько капель воды, кладут окрашенные кусочки бумаги величиной 2x2 см. В течение всего времени прокрашивания бумага должна оставаться влажной и плотно прилегать к поверхности стекла. При подсыхании бумагу дополнительно смачивают водой. Продолжительность окрашивания мазка определяется видом окрашиваемого микроба. По окончании окраски бумагу осторожно снимают пинцетом, а мазок промывают водопроводной водой и подсушивают на воздухе или фильтровальной бумагой.
Окраска мазков растворами красителей. Для ориентировочной окраски высушенного и фиксированного над огнем мазка используют один из следующих красителей:
- на мазок наливают спиртово-водный раствор метиленового синего (рецепт 8) на 3–5 мин;
- водный раствор метиленового синего (рецепт 11) наливают на мазок на 5–10 мин;
- метиленовый синий Леффлера (рецепт 9) окрашивает 1– 2 мин;
- разведенный 1:10 карболовый фуксин (рецепт 18) наливают на фильтровальную бумагу, положенную на фиксированный высушенный мазок для задержки частиц красителя. Окрашивание препарата проводят не более 10–30 с.
Окрашенные препараты промывают водопроводной водой до тех пор, пока в воде не останется следов краски, затем препарат высушивают на воздухе и микроскопируют.