При работе с микроскопом недопустимо применять:
- вогнутую сторону зеркала в сочетании с конденсором Аббе независимо от источника освещения. Во всех случаях следует пользоваться плоским зеркалом;
- произвольное опускание и поднимание конденсора для регулирования освещенности препарата. После установки света по Кёлеру, положение конденсора изменять нельзя;
- предметные стекла большей толщины (более 1,1–1,2 мм), так как это не позволяет установить свет по Кёлеру (их толщина больше рабочего расстояния конденсора);
- нестандартные покровные стекла (толщиной более 0,17 мм), так как это может повредить фронтальные линзы, а иммерсионный объект при использовании сильных сухих систем (х40) не позволяет получить изображение высокого качества;
- суррогаты иммерсионного масла, так как их оптические характеристики могут отличаться от стандартных, что ухудшает качество изображения. Кроме того, они могут содержать агрессивные вещества, повреждающие линзы и растворяющие клей, которым эти линзы склеены;
- произвольное раскрытие апертурной ирис-диафрагмы конденсора. Полностью открытая диафрагма конденсора приводит к потере контраста, полностью закрытая – к ухудшению качества изображения (появление диффракционных ободков).
Таблица 2.1. Некоторые причины ухудшения качества изображения и способы их устранения
Дефект изображения |
Причины |
Способы устранения |
Неправильное освещение |
1. Отсутствие центрировки 2. Виньетирование изображения из-за неправильной установки фильтра. 3. Неправильное положение 4. Неправильная установка 5. Неправильная настройка |
1. Проверить правильность установки оптической и осветительной системы микроскопа. 2. Установить освещение по Кёлеру |
Неконтрастное изображение |
1. Загрязненный или поврежденный объектив. 2. Засохшее иммерсионное |
1. Заменить объектив. 2. Удалить загрязнения |
Нечеткие пятна на микроскопическом изображении в поле зрения (пятна не смещаются при передвижении препарата) |
1. Загрязнение линз и других оптических поверхностей (светофильтров, призм, зеркал и др.) |
1. Выявить участок загрязнения, вращая окуляры, фильтры и др. 2. Удалить загрязнение |
Малоконтрастное изображение при использовании сухих объективов с большой апертурой |
1. Отсутствие покровного 2. Использование покровных стекол нестандартной 3. Неправильная установка 4. Избыток заключающей |
1. Использование стандартных покровных 2. Установка коррекционного кольца в соответствии с толщиной 3. Правильное заключение препарата |
Неконтрастные изображения или тени при использовании иммерсионных объективов |
1. Отсутствие иммерсионного масла между объективом и препаратом. 2. Добавление свежего иммерсионного масла к старому, не удаленному с препарата (тени). 3. Засохшее иммерсионное 4. Пузырьки воздуха в иммерсионном масле. 5. Использование суррогатов иммерсионного масла |
1. Нанести иммерсионное масло. 2. Удалить старое иммерсионное масло. 3. Удалить засохшее 4. Удалить иммерсионное масло с препарата, 5. Использовать стандартное иммерсионное |
Плохой контраст, потеря разрешающей способности |
1. Неправильное раскрытие апертурной диафрагмы: пониженный контраст при слишком большом раскрытии; усиленный контраст с дифракционными кольцами вокруг изображения – при недостаточном раскрытии апертурной диафрагмы |
1. Установить раскрытие апертурной диафрагмы в соответствии с используемым объективом |
Невозможно сфокусировать препарат |
1. Слишком толстое покровное стекло. 2. Большой слой заключающей среды. 3. Неправильно установлено предметное стекло (препарат находится на обратной стороне предметного |
1. Использовать по- 2. Правильно заключать препарат. 3. Наносить на предметное стекло пометки, указывающие положение препарата |
Отсутствие мелких деталей из-за превышения полезного увеличения |
1. Избыточное окулярное увеличение (использование окуляров или проекционных систем, при которых увеличение превышает 500–1000 апертур) |
1. Использовать соответствующие окуляры и проекционные системы |
Нерезкое изображение после смены объектива |
1. Неправильная установка объектива в гнезде револьвера, несовпадение оптических осей (плохая центрировка) |
1. Полностью ввинтить 2. Проверить центрировку |