Общее число мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов (МАФАМ) определяется в 1 мл воды. При посеве воды на питательный агар (рецепты 88, 89) и инкубации при температуре 37±1,0 °С в течение 24 ч образуются колонии, видимые простым глазом или при увеличении в 2 раза.
Из каждой пробы производят посев не менее двух объемов по 1 мл. При исследовании загрязненных вод (вода поверхностных водоемов, шахтных колодцев) предварительно делают разведения воды с последующим ее посевом. Растворы для разбавления разливают по 9 мл в пробирки, затем в первую пробирку вносят 1 мл анализируемой воды. При этом пипетка не должна быть опущена ниже поверхности воды, чтобы избежать смывания бактерий с наружной стороны. Другой стерильной пипеткой тщательно перемешивают содержимое пробирки путем продувания воздуха, отбирают из нее 1 мл и переносят в чашку Петри, что будет соответствовать посеву 0,1 мл анализируемой воды. При необходимости посева меньших объемов этой же пипеткой переносят 1 мл содержимого первой пробирки в следующую пробирку с 9 мл раствора для разбавления. Другой стерильной пипеткой делают посев 1 мл из второй пробирки, что будет соответствовать посеву 0,01 мл анализируемой воды. В случаях высокого уровня загрязнения воды разбавление продолжают аналогично, каждый раз меняя пипетку.
Время от момента приготовления разбавлений и заливки питательным агаром не должно превышать 30 мин.
Методика посева включает перемешивание анализируемой пробы воды, внесение по 1 мл воды в стерильные чашки Петри и прибавление в каждую чашку по 8–12 мл расплавленного и остуженного до 45–49 °С питательного агара. Содержимое чашек быстро и равномерно смешивают, избегая образования пузырьков воздуха и попадания агара на края и крышку чашки. Чашки с застывшим агаром инкубируют; учитывают только те из них, на которых выросло не более 300 изолированных колоний. Результат выражают числом КОЕ в 1 мл исследуемой пробы воды.
Подсчет колоний может осуществляться с помощью автоматизированных счетчиков колоний (рис. 18.2).