Микрофлору воздуха условно разделяют на резидентную (постоянно обнаруживаемую) и временную (обнаруживаемую спорадически). Наибольшее количество микроорганизмов содержится в околоземных слоях атмосферы. По мере удаления от земной поверхности воздух становится чище.
Постоянная микрофлора атмосферного воздуха формируется почвенными микроорганизмами. В ее состав входят М. rоseus, M. luteus, S. maxima, В. subtilis, В. mycoides, В. mesentericus, виды Acinomyces, грибы рода Pénicillium, Aspergillus, Mucor и др.
Временная микрофлора атмосферного воздуха также формируется за счет микроорганизмов почвы и видов, поступающих с поверхности водоемов. Находящиеся в атмосферном воздухе микроорганизмы подвергаются солнечному и температурному воздействию, атмосферным осадкам и ветру. Поэтому микрофлора воздуха весьма динамична, непрерывно меняется и обновляется.
Патогенные микроорганизмы попадают в воздух с мокротой и слюной при кашле, разговоре и чиханье. Даже здоровый человек при каждом акте чиханья выделяет в воздух 10 000 – 20 000 микробных тел, а больной – во много раз больше. Эти мельчайшие капельки могут часами удерживаться в воздухе во взвешенном состоянии, образуя стойкие аэрозоли. В этих капельках за счет влаги микроорганизмы выживают дольше. Таким капельно-воздушным путем происходит заражение многими острыми респираторными заболеваниями, в том числе гриппом, корью, коклюшем, дифтерией, туберкулезом легких и т.д.
Помимо капельного способа, распространение патогенных микробов через воздух может осуществляться "пылевым" путем. Находящиеся в выделениях больных (мокроте, слизи и т.п.) микроорганизмы окружены белковым субстратом; когда такие капли высыхают, они превращаются в своеобразную бактериальную пыль (внутри белкового субстрата сохраняются и выживают многие патогенные бактерии). Частички бактериальной пыли обычно имеют диаметр от 1 до 100 мкм. У частиц с диаметром более 100 мкм сила тяжести превышает сопротивление воздуха, и они быстро оседают. Скорость переноса бактериальной пыли зависит от интенсивности сил воздушных перемещений. Пылевой путь играет особенно важную роль в эпидемиологии туберкулеза, дифтерии, туляремии и других заболеваний.
Количество микробов в воздухе варьирует в широких диапазонах – от нескольких бактерий до десятков тысяч в 1 м3. В 1 г пыли может содержаться до 1 млн бактерий. Большое значение имеет чистота воздуха в операционных, реанимационных и перевязочных отделениях хирургических стационаров. Общее количество микробов в операционной до операции не должно превышать 500 в 1 м3, а после операции – 1000 в 1 м3.
Для исследования микрофлоры воздуха используют различные методы.
- Седиментационный метод (метод Коха[1]), при котором чашки Петри с элективными средами без крышек помещают на горизонтальные поверхности и выдерживают установленное время: 10–30 мин чашки с мясопептонным агаром для определения общего числа микроорганизмов, 15 мин чашки с желточно-солевым агаром для выявления стафилококков, до 2 ч – для выделения грамотрицательных неферментирующих бактерий. В месте забора используют не менее 2 чашек с одной питательной средой. После экспозиции чашки закрывают, переворачивают, помещают в термостат и инкубируют при температуре 37±1 °С в течение 24±2 ч. После инкубации проводят учет количества колоний выросших микроорганизмов и при необходимости идентификацию микроорганизмов до рода и вида.
- Аспирационный метод – это наиболее точный метод по сравнению с седиментационным. В настоящее время при санитарно-бактериологическом и эпидемиологическом контроле воздушной среды для выбора проб воздуха пользуются преимущественно отечественными пробоотборными устройствами (ПУ) нескольких технологических марок, производимых НПО "Химавтоматика", ЗАО "Химка". ПУ-1Б (рис. 20.1 -см. вклейку) обеспечивает отбор проб биологического аэрозоля с величиной частиц диаметром до 1,4 мкм на плотную питательную среду импакционным, т.е. ударным (от англ. слова impact), осаждением. Принцип действия прибора заложен в основе его конструкции. Аспирация воздуха в пробоотборное устройство многосопловую (сопла – суживающиеся, конической формы насадки с диаметром отверстий около 0,8 мм) пластину, непосредственно под которой устанавливают чашки Петри с плотной питательной средой.
При прохождении через сопла решетки поток воздуха с находящимися в нем частицами аэрозоля разделяется на множество струек, скорость течения которых существенно возрастает, вследствие чего взвешенные в воздухе частицы биологического аэрозоля с силой ударяются о питательную среду, фиксируясь на ее поверхности.
Объем исследуемого воздуха прибором ПУ-1Б составляет от 50 до 1000л при скорости прохождения до 250 л/мин.
Отбор проб воздуха в помещениях стационара производят на уровне дыхания лежащего больного или на высоте рабочего стола.
Для определения общего количества бактерий в 1 м3 воздуха отбор производя на 2% питательный агар (рецепты 87-89). Для определения золотистого стафилококка используют желточно-солевой агар (рецепт 81), для определения плесневых и дрожжевых грибов – среду Сабуро (рецепт 136).
После отбора пробы чашки с питательными средами термостатируют при температуре 37±1 °С в течение 24±2 ч, посевы на среде Сабуро инкубируют при температуре 20-22 °С в течении 3 – 4 сут. После инкубации проводят учет количества колоний выросших микроорганизмов.
Санитарно-гигиеническая оценка воздуха лечебно-профилактических учреждений по бактериологическим показателям приведена в табл. 20.1.
[1] Седиментационный метод применяется обычно для качественной характеристики микробного загрязнения воздуха. Однако М.Н. Лебедева в 40—50-е годы XX столетия приняла условно, что на открытую чашку Петри с питательной средой в течение каждых 5 мин оседают частицы биологического аэрозоля из 10 л воздуха, придав таким образом этому методу возможность ориентировочного количественного учета микроорганизмов в воздушной среде исследуемого объекта.